CCK-8 Assay protocol

이번 포스팅은 CCK-8 assay에 대해 설명해 보겠습니다.

 

CCK-8 assay는 cell viability와 cell toxicity를 측정하는데 사용하는 실험입니다.

 

실험 방법이 간단하고 정확한 결과를 얻을 수 있기 때문에 흔히 사용하는 실험입니다. 그럼 실험 원리와 방법에 대해 알아보겠습니다.

 

CCK-8 Assay 원리

 

CCK-8 assay 원리

 

CCK-8 assay의 원리는 그림에서 보는 바와 같이 WST-8 (tetrazolium salts)가 세포 내의 효소인 NADA, NADPH, Dehydrogenase에 의해 발색물인 WST-8 formazan dye로 변형되는 원리를 이용한 것입니다.

 

WST-8 formazan dye의 absorbance를 측정함으로 정량적 데이터를 얻어 세포독성 및 세포활성을 측정할 수 있습니다.

 

CCK-8 Assay 시험방법

 

1. 세포를 1X10^4 in 100ul 씩 96 well plate에 깔아 24h incubation 한다.

 

2. 미디어를 100ul 같은 양으로 교체한 후 실험물질을 10ul씩 투여해 준다.

 

3. 6h, 12h, 24h, 48h 시간으로 incubation 한다.

 

4. 10ul CCK-8 시약을 각 well에 넣어준다.

 

5. 1~4h incubation 한다.

 

6. shaking 후 450nm에서 absorbance를 측정한다.

 

 

 

간단하게 CCK-8 assay의 방법과 원리에 대해 알아보았습니다.

 

실제로 해보면 아주 간단하고 쉬운 실험이니 다들 충분히 잘하실 것입니다.

 

그럼 포스팅을 마치겠습니다. 연구자분들 파이팅!!

출처: Cell Viability & Cytotoxicity Assay Protocol - DOJINDO LABORATORIES