Cellular uptake imaging

Cellular uptake imaging은 세포에 약물전달을 확인할 때 주로 사용하는 실험방법입니다.

 

특히 active targeting 약물전달을 확인할 때 유의한 결과를 얻기에 유용합니다.

 

그럼 Cellular uptake imaging 실험과정에 대해 알아보겠습니다. (24 well plate 사용)

 

세포 형광 이미지

 

준비사항

 

1. Seeding 된 24 well plate

 

2. Free media, PBS, 2% FBS phenol red free media 데우기

 

실험과정

 

1. Seeding 된 24 well plate의 serum media suction

 

2. PBS 500ul로 washing 후 suction

 

3. Drug solution(free media에 drug이 녹아있는 solution) 500ul treat 후 원하는 시간 동안 incubator에 incubation

 

4. Drug solution suction

 

5. PBS 500ul로 washing 후 suction

 

6. 세포핵 염색을 위해 (2ul hoechst 33342 solution + 10ml free media) 500ul를 treat

 *  hoechst 333342 solution은 용매 DMSO에 농도 10mg/ml로 녹여진 용액

 

7. 15분 동안 incubator에 incubation

 

8. (2ul hoechst 33342 solution + 10ml free media) suction

 

9. PBS 500ul로 washing 후 suction

 

10. 2% FBS phenol red free media 500ul를 넣고 형광현미경으로 확인한다.

 * phenol red가 있는 media의 경우 media의 색이 붉은색이기 때문에 형광현미경으로 확인이 잘 안 될 수 있음

 * 2% FBS는 최소한의 세포 생존요건

 

세포 형광 이미지

 

이상 Cellular uptake imaging 준비사항과 실험과정에 대해 알아보았습니다.

 

세포 종류나 처리 물질에 따라 처리시간이 차이가 있을 수 있으니 실험하시면서 적절한 시간을 설정하는 것이 좋을 것 같습니다.

 

또한 형광의 파장에 따라 형광현미경 필터가 필요하니 이 부분도 잘 고려하여 실험을 진행하시기 바랍니다.

 

그럼 다들 좋은 실험결과가 있으시길 바랍니다.