Serum media(Cell culture media) 제조하기 _ FBS(Fetal Bovine Serum) inactivation 포함

세포실험을 하게 되면 serum media를 무조건 사용하게 되는데, 이번 포스팅에서는 serum media 제조에 대해 알아보겠습니다.

 

Serum media를 제조하는 방법은 매우 간단하지만, 제대로 제조하지 않게 되면 세포실험에 큰 영향을 주게 됨으로 꼭 알아야 하는 내용입니다.

 

그럼 시작해 보겠습니다.

 

FBS Inactivaiton

 

Serum meida를 제조하기 전 FBS inactivation을 실시해야 합니다.

 

보통은 FBS가 500ml로 입고가 되는데, FBS 500ml을 FBS inactivation 후에 50ml씩 분주하여 냉동고에 보관 후 사용 전에 녹여 serum free media에 섞어 사용합니다.

 

FBS inactivation은 FBS안에 있을지 모르는 complement와 mycoplasma를 제거하기 위해 시행합니다.

 

FBS에 따라 FBS inactivation을 시행하지 않아도 되는 FBS도 있으니 확인하고 하시기 바랍니다.

 

- FBS inactivation: FBS를 56℃ water bath에 넣고 10분 간격으로 흔들어준다. 이를 3번 반복한다. 끝나면 얼음이 담긴 container에 넣어 빠르게 식혀준다.

 

Serum media 제조

 

1. 냉도고에 있던 FBS와 anti-anti(Antibiotic-Antimycotic)를 water bath에서 녹여 준다.

 

2. 액체상태의 FBS를 원심분리기(2,500 RPM, 10 min)에 돌려 불순물을 제거한다.

 

3. Serum free media 500ml에 FBS 50ml과 anti-anti 5ml을 넣어준다.

 

4. 뚜껑에 닿지 않게 잘 섞어준다.

 

FBS, Serum free media, anti-anti

 

세포에 따라 Serum free media의 종류가 달라짐으로 꼭 확인하시고 세포에 맞게 제조하시기 바랍니다.